Obtención de la sublínea celular CLA-HT. Estudio de su sensibilidad para el aislamiento y multiplicación de los virus del dengue

Introduccion: en el diagnostico de dengue es importante la determinacion del serotipo viral. A pesar de existir otros metodos, el aislamiento viral en cultivos de celulas y la identificacion por la tecnica de inmunofluorescencia siguen siendo muy utilizados. Por lo tanto, la busqueda de sistemas celulares mas sensibles ha sido un tema reiterado durante muchos anos para el virus dengue y otros agentes. Objetivo: obtener una sublinea celular a partir del clon CLA-1 ( Aedes pseudoscutellaris ) que crece a 28 o C, capaz de multiplicarse a 33 o C (CLA-HT) y evaluar su utilidad para el aislamiento y la identificacion de los virus del dengue. Metodos: a partir del clono CLA-1 de la linea celular AP-61( Aedes pseudoscutellaris ) se obtuvo por seleccion una cepa o sublinea celular CLA-HT capaz de crecer a 33 ° C. Se estudio su sensibilidad para la multiplicacion de los 4 serotipos del virus del dengue y su eficiencia para el aislamiento directo de sueros de pacientes en fase aguda de la enfermedad, ambos comparativamente con la linea C6/36HT ( A. albopictus ). Resultados: la sublinea CLA-HT permitio el crecimiento de los 4 serotipos del virus dengue aunque para algunos requirio mas tiempo que la C6/36 HT. Para el aislamiento a partir de muestras de sueros colectadas de individuos en fase aguda, la sublinea CLA-HT detecto el virus en el 40 % de las muestras, mientras que C6/36 detecto el virus en el 50 %. Discusion: CLA-HT es capaz de detectar todos los serotipos del virus dengue a partir de las 96 horas pos inoculacion, por lo que es util para la investigacion como sistema alternativo y su eficiencia de aislamiento directo es buena para aplicar en grandes brotes. Ademas, la principal ventaja es que es posible utilizarla para proporcionar una respuesta rapida a situaciones emergentes en laboratorios de escasos recursos, ya que no precisa de condiciones de incubacion con CO 2 . Conclusiones: se obtuvo una sublinea CLA-HT a partir de la linea CLA-1 capaz de crecer a 33 o C, la cual detecta los 4 serotipos del virus dengue. Su eficiencia de aislamiento es ligeramente menor que la sublinea C6/36 HT, pero se puede utilizar como sistema alternativo para el aislamiento de los virus dengue sobre todo en laboratorios con bajos recursos que no cuenten con condiciones optimas de incubacion.