乙酰肝素酶稳定表达细胞株的建立
Journal of China Pharmaceutical University（2006）
摘要
目的:在真核细胞中表达人乙酰肝素酶(HPA)并建立该酶的稳定表达细胞株.方法:构建包含人乙酰肝素酶全长编码序列的真核表达载体pcDNA-hpaFL,转染CHO-K1细胞,G418筛选稳定表达细胞株.通过RT-PCR,Western-blot分析与鉴定蛋白的表达;用荧光HPLC法检测蛋白的活性.结果:在CHO-K1细胞中成功地表达出有活性的人乙酰肝素酶,并获得该酶的稳定表达细胞株.结论:成功地建立了人乙酰肝素酶稳定表达细胞株,为其抑制剂的筛选及其功能的研究奠定了基础.
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关键词
Heparanase,Stable expression,Tumor metastasis
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