THP-1细胞系白血病干细胞的检测、分选及鉴定

目的:探讨人急性单核细胞白血病THP-1细胞株中是否存在白血病干细胞(LSCs),并比较该LSCs与非LSCs亚群的生物学特性。方法:应用流式细胞术测定THP-1细胞中LSCs(CD34+CD38-细胞)的比例并分析LSCs与非LSCs的细胞周期。实时荧光定量PCR检测2种细胞中ABCG2、ABCB1耐药基因和Bcl-2、Bax凋亡基因的表达。将分选的LSCs移植到NOD/SCID小鼠,观察其致瘤能力。结果:THP-1细胞中存在CD34+CD38-的LSCs,比例为(0.12±0.06)%。大部分的LSCs处于细胞静止期,G0/G1期比例达(94.03±1.61)%;非LSCs增殖期细胞比例相对较高,S/G2/M期细胞比例为(56.58±1.59)%。实时荧光定量PCR结果显示:LSCs中ABCG2、ABCB1及Bcl-2的表达水平高于非LSCs(t=20.725、22.179、13.707,P<0.001),Bax在两亚群的表达无差异(t=1.635,P=0.071),但是LSCsBcl-2/Bax比值高于非LSCs(t=10.781,P<0.001)。1×103数量的LSCs可在4周后形成典型的NOD/SCID小鼠白血病浸润模型,未分选的THP-1细胞至少需要1×106才能成瘤。结论:THP-1细胞株中存在LSCs,这群细胞比例低,大部分处于静止期,具有干细胞生物学活性及体内致瘤性,可能与白血病的耐药和复发有关。