PCR技术在快速诊断艾滋病合并播散性马尔尼菲青霉菌病中的应用

目的 探讨PCR技术在快速诊断艾滋病(AIDS)合并播散性马尔尼菲青霉病(PSM)中的应用价值.方法 收集21例AIDS合并播散性PSM患者抗真菌治疗前的系列标本:未培养血液、阳性血液培养物和阳性骨髓培养物,以12例健康人血液为阴性对照.提取上述标本的基因组DNA,采用真菌通用引物ITS1和ITS4对基因组DNA进行PCR扩增,扩增产物测序后与GenBank核酸序列数据库进行比对分析.结果 21份阳性血液培养物、21份阳性骨髓培养物及2份未培养血液标本均扩增出目的 条带,而12份健康人血液标本未扩增出条带.阳性PCR产物测序结果 与广东、日本、泰国、印度尼西亚的马尔尼菲青霉菌(PM) rDNA ITS序列(登录号分别为AB298970、AB298950、L37406、AJ853738)一致性高达97%～100%,证实为PM.PM与新型隐球菌及烟曲霉菌rDNA ITS序列的遗传距离最远,与青霉菌属其他菌种绳状青霉菌和桔青霉菌rDNA ITS序列的遗传距离最近.结论 PCR可敏感、特异的检测出培养阳性标本中PM,并能有效缩短PM检出时间,但直接采用患者血液进行PCR检测的阳性率较低,方法有待改进.