腺病毒介导的人巨细胞病毒UL49基因小鼠模型的建立

YANG Dan,CUI Yan-wei, LI Hong-jian,LI Yue-qin,ZHOU Qi,ZENG Zhi-feng,ZHANG Xin,YANG Guang,ZHOU Tian-hong

Zhongguo shengwu gongcheng zazhi（2010）

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摘要

建立表达HCMV UL49基因的转基因小鼠,为抗病毒药物研究提供有效的实验动物模型.将UL49-GFP基因插入腺病毒穿梭质粒pDC316中,构建重组质粒pDC316-UL49-GFP,与腺病毒骨架质粒pBHGloxAE1,3Cre通过脂质体介导共转染293细胞,重组产生腺病毒Ad-UL49-GFP,经PCR和Western blot鉴定正确后,大量扩增、纯化,制备高滴度重组腺病毒.纯化腺病毒经尾静脉注射感染小鼠,通过荧光定量PCR和Western blot方法,检测UL49基因在小鼠体内组织分布和表达时相.结果显示UL49基因在小鼠的心、肝、脾、肺、肾组织均有表达,并且表达量由高到低顺序依次是:肝、脾、肾、心、肺,在腺病毒感染第3天在各靶器官表达水平较高,此后逐渐下降,第14天时仅存在肝和脾中.表明表达UL49基因的小鼠模型构建成功.小鼠模型的成功建立为下一步筛选以UL49基因为靶的抗病毒药物奠定了基础.

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关键词

Human cytomegalovirus,UL49 gene,Adenovirus vectors,Animal model

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