乙肝表面抗原和弓形虫棒状体分泌抗原多功能真核表达载体的构建与鉴定

目的 探讨通过体外扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因,构建真核表达载体pcDNA3-HBsAg-ROP2的可行性.方法 根据乙肝S基因序列及pcDNA3-p30-ROP2酶切位点等情况设计、合成引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术,扩增HBsAg基因片段;应用回收、纯化、酶切、连接等技术,将HBsAg基因替换pcDNA3-p30-ROP2中的p30基因,并进行酶切、PCR扩增及测序鉴定.结果 PCR扩增出约0.7 kb的目的 基因HBsAg,成功构建pcDNA3-HBsAg-ROP2重组载体.PCR、酶切结果与理论相符,重组体包含了HBsAg和ROP2基因的完整序列.结论 利用体外扩增乙肝表面抗原,可成功构建乙肝和弓形虫多功能重组载体pcDNA3-HBsAg-ROP2.