腺病毒介导的RNA干扰降低VEGF转录抑制血管形成的研究

Xu Jianfeng,Shen Weigan,Peng Wanxin,Li Chaojun

Journal of Nanjing Normal University(Engineering and Technology Edition)（2007）

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摘要

用细菌内同源重组的方法构建了针对VEGF的siRNA表达重组腺病毒AdH1-siRNA/VEGF,感染HUVEC细胞,观察该病毒对HUVEC细胞体外增殖和形成微血管的干扰作用.通过Real-timeRT-PCR实验表明,AdH1-siRNA/VEGF可特异性地下调血管内皮细胞(HUVEC)中的VEGFmRNA水平.与对照组相比,VEGF的mRNA水平下降为50%,AdH1-siRNA/VEGF对HUVEC细胞增殖有干扰作用.加入病毒9d后,对照组的细胞平均计数为31.5×104/μL,干扰病毒对照组为28×104/μL,AdH1-siRNA/VEGF干扰组为21.5×104/μL.AdH1-siRNA/VEGF对HUVEC细胞在Matrigel上形成微血管有干扰作用,对照组每HPF形成微血管数量为10.75条,干扰病毒对照组为10.25条,实验组AdH1-siRNA/VEGF每HPF形成微血管数量为7条.证明AdH1-siRNA/VEGF可以干扰血管形成.

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关键词

VEGF,angiogenesis,RNAi

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