百喜草体细胞耐盐突变体筛选技术研究

为了提高体细胞耐盐突变体筛选的效率,本试验研究不同浓度氯化钠(NaCl)对百喜草愈伤组织分化和植株再生的影响.在琼脂浓度为8 g/L和16 g/L的继代培养基上,以百喜草品种太阳花的成熟种子分别诱导产生湿润、粘连和干燥、松散2种类型的颗粒状愈伤组织.在NaCl浓度为0(对照)、1.2％、1.6％、2.0％的培养基上分别筛选30 d,干燥、松散颗粒状愈伤组织的绿芽分化率分别为36.1％、20.4％、19.0％和9.3％,绿芽的植株再生率分别为52.6％、46.3％、30.0％和20.6％；湿润、粘连颗粒状愈伤组织的绿芽分化率分别为15.3％、3.6％、0.7％和0,绿芽的植株再生率分别为25.8％(对照)、16.7％(1.2％ NaCl)和0(1.6％ NaCl).表明干燥、松散的颗粒状胚性愈伤组织适宜被选做体细胞耐盐突变体筇选材料.SSR分子标记检测结果显示,479对引物组合中有8对引物在百喜草田间实生苗、组织培养再生植株和不同NaCl浓度(1.2％、1.6％、2.0％)筛选得到的再生植株混合株之间PCR扩增存在多态,其中2对引物WXE-30和WXE-246适用于耐盐突变体分子鉴定.