分离方法及卵巢状况对猪次级卵泡采集数量的影响

[目的]探讨影响猪腔前卵泡分离的因素,建立有效分离猪腔前卵泡的方法.[方法]以猪次级卵泡为对象,比较4种分离方法和11种卵巢状况对猪次级卵泡采集数量的影响.[结果]针刮法分离猪次级卵泡的数量((14.37±2.29)枚)极显著高于剪碎法((5.62±2.67)枚)、显微分离法((8.28±2.53)枚)和酶消化-机械分离法((8.86±1.91)枚),而且针刮法的处理时间((15.29±1.82)min)较其他3种方法短((20.51±1.99)min、(59.24±4.59)min、(40.59±2.67)min),分离得到的次级卵泡体外培养3 d后,存活率在针刮法(53.29%)、剪碎法(51.08%)、显微分离法(49.87%)之间无明显差异,但均极显著高于酶消化一机械分离法(28.31%).从不同质量卵巢中采集的次级卵泡数量有较大差异,质量为>3.0～≤8.0 g((15.36±2.32)枚)的卵巢得到的次级卵泡数量较≤3.0g((6.31±2.19)枚)和>8.0 g((7.83±2.71)枚)多.卵巢有无黄体与次级卵泡的采集数量无明显关系;卵巢上不同大小的可见卵泡数量和分布与腔前卵泡的采集数量相关,卵巢上可见卵泡均衡分布,中、小卵泡较多而无大卵泡,无论黄体存在与否,均可获得较多次级卵泡.[结论]针刮法是分离猪次级卵泡的一种有效方法;在分离卵泡时,要选择质量在3.0～8.0 g,且有可见中、小卵泡均衡分布而无大卵泡的卵巢.