hHBrk1与WAVE1蛋白相互作用位点的鉴定

目的:鉴定微丝相关蛋白hHBrk1与WAVE1的结合位点。方法:利用PCR的方法克隆人WAVE1及各结构域的基因片段,并将之亚克隆至真核表达载体;免疫共沉淀技术检测hHBrk1与WAVE1结合位点。结果:获得了WAVE1及各结构域基因的真核表达载体;免疫共沉淀发现hHBrk1与WAVE1的Scar同源结构域(SHD)结合,而WAVE1蛋白结合于hHBrk1的羧基端,羧基端七肽重复(HR)结构域点突变后获得的蛋白失去了与WAVE1的结合能力。结论:hHBrk1可能通过HR结构域与WAVE1的SHD区结合,参与WAVE1蛋白的细胞亚定位或维持其稳定性,从而调控肿瘤细胞的迁移。