间接酶联免疫吸附法检测体液水通道蛋白-2浓度

目的:建立定量检测体液中微量水通道蛋白-2(AQP2)的酶联免疫吸附试验(ELISA),并用此方法检测羊水及新生儿尿液AQP2浓度。方法:人工合成AQP2蛋白特异性多肽片段,并与匙孔戚血蓝素联接制备兔抗AQP2多肽片段的多克隆抗体;建立检测AQP2的间接ELISA;并应用其对足月新生儿尿及孕足月羊水与成人尿样本进行AQP2的检测。结果:间接ELISA成功建立,灵敏度为2.5pmol/mL,批内及批间变异系数分别为4.15%和7.89%。用该法定量检测羊水与尿液中AQP2浓度,成人尿/新生儿3d尿中AQP2的浓度分别为(112.73±8.30)和(8.87±1.98)pmol/mL;孕足月羊水中未检测到AQP2的存在。结论:成功建立体液中微量AQP2间接ELISA,羊水中未检测到AQP2的表达。