MafA逆转录病毒表达载体的构建及其在肝原始细胞中的稳定表达

目的:构建表达MafA(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologue A)的逆转录病毒表达载体,并建立稳定表达MafA的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs).方法:通过PCR方法克隆MafA基因全长,将其构建到pBMN-Z-IRES-Neo逆转录病毒载体中获得pBMN-MafA-Neo载体;将该载体导入Phoenix包装细胞系,收集病毒上清并感染LEPCs,筛选稳定表达MafA的LEPCs;RT-PCR方法检测MafA表达对LEPCs分子表型的影响.结果:成功构建pBMN-MafA-Neo载体,并获得稳定表达MafA基因的肝原始细胞系(LEPCs-MafA).LEPCs-MafA细胞GK和GLUT2基因表达高于LEPCs.结论:成功获得稳定表达MafA的肝原始细胞系,为研究MafA诱导肝干细胞向胰腺细胞转分化奠定了基础.