胎盘WNT5A表达异常通过影响滋养细胞侵袭参与子痫前期发生

目的:探讨WNT5A在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达及其对滋养层细胞侵袭的影响和潜在作用机制.方法:收集 27 例PE孕妇及 38 例正常孕妇的胎盘组织,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测WNT5A表达;Transwell侵袭实验检测人重组WNT5A蛋白(200ng/mL)处理对人永生化绒毛外滋养细胞系(HTR8/SVneo)侵袭的影响;Western blot检测WNT5A对人类原代EVT细胞胞浆内活化的β-catenin蛋白水平作用.基于空白对照组和重组BMP2 蛋白(25ng/mL)处理组的HTR8/SVneo转录组测序数据,明确BMP2 对WNT5A的调控作用,并在HTR8/SVneo和原代人类EVT细胞中,通过RT-qPCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平上验证BMP2 对WNT5A和活化β-catenin的调控作用;结合BMP2 受体抑制剂DMH-1 预处理HTR8/SVneo细胞,验证BMP2调控WNT5A表达所需受体及信号通路.结果:与正常孕妇相比,PE 患者胎盘组织中WNT5A水平显著降低.胎盘 WNT5A mRNA 水平可较好地用于 PE 诊断,曲线下面积(AUC)为0.844(95%CI为0.74～0.95,P＜0.001).外源性人重组WNT5A蛋白添加可明显提高HTR8/SVneo细胞侵袭力,并抑制EVT细胞内活化β-catenin表达(P＜0.05).人重组BMP2 蛋白处理后可降低HTR8/SVneo和EVT细胞中WNT5A表达,提高细胞内活化β-catenin表达水平(P＜0.05).BMP2 蛋白处理后可提高HTR8/SVneo细胞磷酸化的SMAD1/5/9 蛋白表达,BMP2 受体拮抗剂DMH-1 预处理可阻断这一上调作用.结论:PE患者胎盘组织中WNT5A表达下调,其表达受到BMP2 激活的SMAD1/5/9 信号通路调控,并通过影响滋养细胞侵袭,参与PE发生.