绵羊细菌性腹泻病多重PCR方法建立与初步应用

The Chinese Livestock and Poultry Breeding（2018）

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摘要

根据GenBank中的羊产气荚膜梭菌(CP)α毒素基因、大肠杆菌(E.coli)K99菌毛毒力因子、肠炎沙门氏菌(SE)外膜蛋白A基因(ompA)、多杀性巴氏杆菌(Pm)K基因序列,设计了4对引物,建立了检测羊产气荚膜梭菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌和多杀性巴氏杆菌的多重PCR诊断方法,扩增产物分别为258bp、151bp、384bp、585bp.敏感性、特异性结果显示,该PCR敏感性分别为羊产气荚膜梭菌6.0ng/L、大肠杆菌4.0ng/L、肠炎沙门氏菌0.4ng/L、多杀性巴氏杆菌4.0ng/L,而金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、结核杆菌等的扩增结果均为阴性.对1094份腹泻病羊粪便的检测结果表明,该多重PCR检测结果与单一PCR检测结果完全符合.结果表明,该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于绵羊细菌性腹泻病的临床检测.

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