BMSCs外泌体来源miR-133a对大鼠脊髓损伤修复的影响
Hebei Medical Journal(2023)
Abstract
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体来源 miR-133a 对大鼠脊髓损伤(SCI)修复的影响.方法 原代分离和培养BMSCs,测定BMSCs细胞表面标记物(CD90,CD45)表达;提取BMSCs外泌体,观察外泌体形态及外泌体标记分子(Alix、CD63)表达;建立SCI大鼠模型,随机将大鼠分为假手术组、SCI组、外泌体组、外泌体-抑制剂对照(NC)组、外泌体-miR-133a抑制剂组,28 d后,对各组大鼠进行BBB评分评估脊髓损伤程度;分离大鼠骨髓组织,检测该组织病理学变化、细胞凋亡状况;同时检测相关蛋白[胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核抗原(NeuN)、炎性小体 3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase)-1]及 miR-133a表达水平.双荧光素酶实验验证 miR-133a、NLRP3 靶向关系.结果 BMSCs细胞中CD90、CD45 表达率分别为 98.07%、0.09%.外泌体呈球形,Alix、CD63 呈阳性表达.与假手术组比较,SCI组BBB评分、NeuN、miR-133a表达显著降低,细胞凋亡率、GFAP、NLRP3、caspase-1 表达显著增加(P<0.05);与 SCI 组比较,外泌体组 BBB 评分、NeuN、miR-133a 表达显著增加,细胞凋亡率、GFAP、NLRP3、caspase-1表达显著降低(P<0.05);抑制miR-133a表达逆转了外泌体对SCI大鼠的修复作用(P<0.05).结论 BMSCs外泌体来源miR-133a,可对SCI大鼠起到修复作用.
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