基于ob/ob小鼠的非酒精性脂肪肝模型构建方法比较
Laboratory Animal Science(2023)
摘要
目的 比较几种非酒精脂肪肝造模方法在ob/ob小鼠上的特征,建立基于ob/ob小鼠的非酒精性脂肪肝模型.方法 首先在C57小鼠背景下,敲除瘦素基因的第二和第三个外显子,得到瘦素基因敲除的ob小鼠,即B-ob/ob小鼠,然后在B-ob/ob小鼠的基础上,分别进行HFMCD、WD诱导、WD联合四氯化碳诱导,并分析几种诱导方式下小鼠血清中ALT、AST、三酰甘油和胆固醇的含量;病理HE染色进行非酒精性脂肪肝NAS积分评定;天狼星红染色进行肝纤维化程度评定,免疫组化染色对肝内炎性反应和纤维化程度进行定量分析.结果 B-ob/ob小鼠,在正常饮食条件下,不经任何诱导,肝中有一定的脂肪累积和气球样变.在HFMCD诱导6周以后,肝ALT显著升高,肝纤维化增加.WD诱导12周以后,HE染色分析除了脂肪样变和气球样变以外,肝出现一定程度的小叶内炎性反应.WD联合四氯化碳诱导后,HE染色肝脂肪变,气球样变,小叶内炎性特征均比较明显,同时肝纤维化程度也明显增加,免疫组化结果显示肝巨噬细胞的标志物F4/80和肝星状细胞活化的标志物α-SMA都有显著的增加.结论 B-ob/ob经过西方饮食和四氯化碳联合诱导,可以短时间内较为全面模拟非酒精性脂肪肝的病理特征,是一种较好的非酒精性脂肪肝病动物模型.
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