杉虎斑Galectin-8基因克隆及其在不同阿魏酸水平饲料下的表达响应

Galectin-8是半乳糖凝集素家族的成员,对β-半乳糖苷类能够特异性识别,具有多种生物学功能.为研究杉虎斑(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.polyphekadion♂)Galectin-8基因的序列特征、组织表达情况与饲料中添加阿魏酸(ferulic acid,FA)对其表达的影响,使用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)首次克隆得到了其全长cDNA序列.该序列长1368 bp,其中5'UTR为16 bp,3'UTR为394 bp,开放阅读框(ORF)长960 bp,共编码319个氨基酸.该氨基酸序列在N端和C端上各具有一个糖识别结构域(carbohydrate binding domain,CRD),分别由136和133个氨基酸组成,由长为36个氨基酸的连接肽所连接,并包含两个保守基序H-NPR和WG-EE.同源性与系统发育进化树分析表明,杉虎斑Galectin-8与鞍带石斑鱼的一致性最高,为98.43％,并与其他硬骨鱼类聚为一支.RT-qPCR结果显示,Galectin-8在杉虎斑脾脏中表达量最高,其次是中肾、心脏、肠道、肝脏、头肾和鳃,而在脑、胃、皮肤和肌肉组织中微量表达.饲料中添加40-320 mg/kg的FA时,肠道、肝脏、头肾和脾脏的Galectin-8表达量显著上调(P<0.05),这表明FA可作为免疫刺激剂增强杉虎斑的先天性免疫.然而,杉虎斑Galectin-8的免疫功能尚不清,需要进一步的研究来阐明,以了解其在抵抗病原体入侵中的作用.