基于ISSR的半夏离体培养材料遗传稳定性研究

目的:对连续继代的1～8代组培苗及移栽后1～3代半夏进行遗传稳定性分析,为半夏人工种子的研制提供参考依据.方法:以块茎作为外植体离体培养的连续1～8代组培苗、移栽后的1～3代半夏为材料,筛选引物、最佳退火温度以及DNA模板,建立ISSR-PCR反应体系,统计条带,计算多态率;并利用Ntsyspc 2.1对条带数据进行聚类分析.结果:筛选出18个条带清晰、完整的引物,共扩增出225个条带;其中1～4代组培苗及移栽后1～3代半夏均为单态带,多态位点百分率为0,5～8代组培苗共有32个多态条带,多态率2.78％～10.26％;UPGMA聚类结果表明1～4代组培苗基因型没有发生明显改变.结论:连续继代1～4代组培苗及移栽后1～3代半夏具有遗传稳定性,可作为优选材料用于半夏的人工繁殖;为半夏人工种子研制、良种繁育及大规模工厂化生产提供了分子理论依据.