US3/US7/US8/UL23/UL50基因缺失重组伪狂犬病病毒的构建及对犬致病性分析
Chinese Journal of Veterinary Science(2022)
摘要
自2011年以来,伪狂犬病(PR)在我国猪群中暴发,为控制PR的传播,基于流行的变异株研制了 US7/US8/UL23缺失重组伪狂犬病病毒(rPRV)疫苗.疫苗可以对猪提供有效的免疫保护,但由于食用被污染的生肉或免疫猪的内脏,毛皮动物如犬、狐狸、水貂等越来越多地受到PRV弱毒疫苗株的感染,该感染对于毛皮动物是致死性的.本研究以rPRVdelUS7/US8/UL23为基础,利用CRISPR/Cas9介导的同源重组技术构建rPRVdelUS7/US8/UL23/US3/UL50;比较了rPR VdelUS7/US8/UL23(三缺失)和rPR VdelUS7/US8/UL23/US3/UL50(五缺失)的体外生长动力学和对犬致病性.结果显示,重组病毒rPRVdeIUS7/US8/UL23/US3/UL50在感染后24~48 h的生长动力学低于rPRVdelUS7/US8/UL23.此外,rPRVdelUS7/US8/UL23感染细胞可产生细胞融合现象,而rPRVdelUS7/US8/UL23/US3/UL50感染细胞未形成细胞融合.US7/US8/UL23缺失rPR V攻毒的犬表现出明显的神经症状,所有犬均死亡,但用US7/US8/UL23/US3/UL50缺失rPRV攻毒的犬未表现出任何神经症状,所有犬在试验期间均存活.组织病毒载量分析并未显示出明显差异.本研究结果表明,US7/US8/UL23/US3/UL50缺失的rPRV对犬无致病力,同时也凸显了 US3、UL50基因在PRV感染犬等毛皮动物呈现高毒力中的作用,为研发更安全的疫苗提供了策略.
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