SLC2A9基因rs13137074位点双荧光素酶报告系统的构建及其对基因活性的影响
International Journal of Laboratory Medicine（2022）
摘要
目的 构建该实验室定点突变联合双荧光素酶报告系统,并通过该系统了解rs13137074基因位点突变对葡萄糖易化转运蛋白-9(SLC2A9)基因转录活性的影响.方法 采用定点突变法对rs13137074基因位点进行点突变,并通过双酶切的方式连接构建双荧光素酶报告系统质粒.随后通过细胞转染及荧光素酶检测等方法确定突变位点对SLC2A9基因转录活性的影响程度.结果 rs13137074基因位点突变成功;质粒转染过程中Lipofectamine 3000终水平为1.5μL/mL,转染时间为48 h时效果最佳;rs13137074位点发生突变时可导致SLC2A9基因转录活性下降23.60％.结论 人群血尿酸水平可能受SLC2A9基因调控区rs13137074位点单核苷酸多态性的影响.
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