干眼症小鼠模型自噬水平变化及其对炎症反应的调节作用研究

目的 探究干眼症小鼠模型自噬水平变化及其对炎症反应的调节作用研究.方法 选取6～8周龄无特定病原级雄性小鼠120只,随机数字表法分为正常组、假手术组、手术对照组、雷帕霉素组4组,每组各30只.通过切开双侧睾丸和附睾制备干眼症小鼠模型,正常组小鼠不做任何处理,假手术组小鼠手术只切开阴囊而不切除睾丸,手术对照组小鼠于建模后经腹腔注射0.9％氯化钠溶液,雷帕霉素组于建模后经腹腔注射200μL雷帕霉素.各组分别于给药后2、4、8、24 h取3只小鼠行泪腺破裂时间检查、角膜荧光素染色检查及取双眼泪腺、角膜组织做切片,行免疫组织化学染色观察小鼠角膜上皮细胞自噬泡聚集数量及炎症因子白细胞介素2(IL-2)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平.结果 与正常组、假手术组比较,手术对照组2、4 h时泪腺破裂时间更长,8、24 h时泪腺破裂时间更短,差异均有统计学意义(P<0.05);与手术对照组比较,雷帕霉素组2、4 h时泪腺破裂时间更短,8、24 h时泪腺破裂时间更长,差异均有统计学意义(P<0.05).与正常组、假手术组比较,手术对照组各时间点IL-2、CRP、TNF-α表达水平升高,角膜上皮细胞自噬泡聚集数量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与手术对照组比较,雷帕霉素组各时间点IL-2、CRP、TNF-α表达水平降低,角膜上皮细胞自噬泡聚集数量升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 自噬水平变化可通过抑制炎症反应而减轻泪腺分泌功能和角膜上皮损害,从而起到保护眼部功能作用,这可能为干眼症的新治疗靶点.