RNAscope原位杂交技术在胃癌PD-1、PD-L1表达分析中的应用

目的 探讨RNAscope原位杂交技术在检测胃癌程序性死亡受体-1(programmed death 1,PD-1)及程序性死亡配体-1(programmed death-ligand 1,PD-L1)表达中的应用价值.方法 利用RNAscope原位杂交技术检测255例胃癌中PD-1、PD-L1 mRNA表达水平;应用免疫组化EnVision法检测255例胃癌中PD-1、PD-L1蛋白表达水平.结果 RNAscope检测结果显示:PD-1、PD-L1 mRNA阳性为细胞质或细胞核中有棕黄色颗粒状物.PD-1 mRNA阳性定位于肿瘤间质免疫细胞,PD-L1 mRNA阳性定位于肿瘤细胞或肿瘤间质免疫细胞.PD-1 mRNA阳性率为20.39％(52/255),PD-L1 mR-NA阳性率为14.12％(36/255).免疫组化检测显示:PD-1阳性定位于细胞质,PD-1主要表达于肿瘤间质免疫细胞;PD-L1可表达于肿瘤细胞或肿瘤间质免疫细胞,肿瘤细胞PD-L1阳性定位于细胞膜(部分或完全膜染色),免疫细胞PD-L1阳性定位于细胞质或细胞膜.PD-1蛋白阳性率为14.12％(36/255),PD-L1蛋白阳性率为10.98％(28/255).免疫组化与RNAscope原位杂交技术检测的一致性分析显示:PD-1的Kappa=0.154,P=0.012,一致性较差;PD-L1的Kappa=0.465,P<0.001,一致性中等.PD-1、PD-L1 mRNA表达与各临床病理特征均无关(P均>0.05).Kaplan-Meier分析显示:PD-1 mRNA表达与患者的总生存期(overall sur-vival,OS)无关(P=0.270);PD-L1 mRNA表达与患者的OS相关,PD-L1 mRNA阳性患者较阴性患者的OS延长(P=0.017).结论 RNAscope和免疫组化法检测PD-1的一致性较差,PD-L1的一致性中等.PD-1 mRNA表达与患者的OS无关,PD-L1 mRNA阳性患者较PD-L1 mRNA阴性患者的OS延长.