1株猪源芳香黄杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为确定贵州省仁怀某养殖场出现咳嗽、发烧、间歇性腹泻猪的发病原因,本研究从无菌采集的患病猪心脏、肺脏等组织样品中分离到1株病原菌,对其纯化培养后进行形态学检测,发现该菌落在TSA培养基、LB培养基均长出肉眼可见的淡黄色、表面光滑、有芳香味的圆形菌落;在血平板上长出无溶血现象的乳白色、表面光滑的圆形菌落;继续培养12 h后发现,LB培养基上菌落呈棕色,TSA培养基和血平板上的菌落则无变化.革兰氏染色镜检可见红色的长杆菌.进一步生化鉴定结果显示该分离菌的生化特性与芳香黄杆菌符合.对细菌16S rRNA基因PCR扩增分析并构建进化树,结果显示,分离菌株与芳香黄杆菌OM424株(MK034244)基因序列同源性为99％以上,且与芳香黄杆菌OM424株(MK034244)和芳香黄杆菌TH-19株(NR133793)属于同一个遗传进化分支,遗传关系较近.以上结果可确定该分离菌为芳香黄杆菌,将其命名为RH564.药敏试验结果显示,RH564株仅对红霉素、麦迪霉素、万古霉素敏感,表明芳香黄杆菌对多种抗生素耐药性较强.以4×108cfu/只剂量反复涂抹实验鼠伤口,进行小鼠致病性试验,结果显示,感染组小鼠均出现临床症状,甚至死亡,并且可从死亡小鼠的肺脏、肝脏中检测到该分离菌株,表明芳香黄杆菌RH564株具有一定的致病性.本研究首次在中国分离出猪源芳香黄杆菌,为临床上芳香黄杆菌病的预防和治疗奠定了基础.