白细胞滤器去除血液肿瘤细胞的实验研究

目的 了解白细胞滤器去除血液中肿瘤细胞的效果及其用于肿瘤患者术中回收式自体输血的可行性.方法 将体外培养的人结肠癌细胞HCT116加入200 mL人全血制备的去白细胞悬浮红细胞(简称去白悬红)中,模拟肿瘤患者术中回收的自体血液.分别采用常规(A组,n = 6),滤膜孔径较小(B组,n = 6)和滤膜较厚且孔径较小(C组,n = 6)3种白细胞滤器(简称滤器)过滤;利用抗-CD45-PE、抗-CD326(EpCAM)-FITC流式细胞术检测3组中的CD45-EpCAM+肿瘤细胞数量,以Flow Count荧光计数微球做绝对定量计数,采用细胞培养和台盼蓝染色镜检检测肿瘤细胞活性,全自动生化仪速率法检测血液乳酸脱氢酶(LDH)、离子选择性电极间接法测K+浓度,称重法计算血液回收率.结果 流式细胞计数:A、B、C 3种(组)滤器滤除前血液中的肿瘤细胞数(×107/mL)分别为1.52±0.48、1.48±0.55、1.44±0.46,滤除后的肿瘤细胞数(×104/mL)分别为2.73±1.74、2.96±1.85、3.08±2.33(P＜0.01).A、B、C 3组过滤后的血液培养7 d均未见存活肿瘤细胞,过滤前后3个组之间K+、LDH含量相近(P＞0.05),3组的血液回收率分别为85.22％、84.97％、82.86％.结论 常规使用的滤器可明显降低循环肿瘤细胞的数量,用于肿瘤患者术中自体血回收输注具有一定可行性.