利用Cre/loxP系统构建乳腺细胞特异性敲除SENP7基因的小鼠模型

目的:应用Cre-loxP系统构建乳腺细胞SENP7基因条件性敲除的小鼠模型并进行鉴定.方法:将SENP7flox/+杂合子小鼠进行杂交,PCR法鉴定为SENP7flox/flox纯合子小鼠,再与MMTV-Cre杂合子小鼠进行数代杂交,基因型鉴定并筛选获得MMTV-Cre×SENP7flox/flox小鼠,即实验所需的SENP7基因特异性敲除小鼠.采用Real-Time PCR、Western blot和HE染色鉴定SENP7敲除效果,观察乳腺组织形态.结果:PCR基因扩增筛选出基因型为MMTV-Cre×SENP7flox/flox小鼠.与MMTV-Cre×SENP7+/+小鼠相比,MMTV-Cre×SENP7flox/flox小鼠乳腺SENP7基因的mRNA、蛋白表达水平显著降低,乳腺腺体数量明显减少.结论:本研究利用Cre-loxP技术成功构建了乳腺特异性敲除SENP7基因的纯合子小鼠,为进一步研究SENP7基因在乳腺肿瘤发生发展中的作用提供了优良的工具.