芹菜素抑制人良性胆管瘢痕成纤维细胞的增殖迁移并诱导其凋亡和机制

目的 研究芹菜素对体外原代培养的人良性胆管瘢痕成纤维细胞(HBBDSF)的增殖、迁移、凋亡的影响,以及观察对细胞中的转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)的表达水平的影响.方法 体外原代培养HBBDSF并鉴定,细胞计数试剂盒(CCK-8)法和BeyoClickTM EdU-488细胞增殖检测试剂盒(EDU-488)法检测芹菜素对细胞增殖的影响;细胞划痕实验检测芹菜素对细胞迁移能力的影响;流式细胞仪检测芹菜素诱导细胞凋亡情况;细胞免疫荧光和Western blotting检测经芹菜素干预后细胞中TGF-β1、α-SMA、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白的表达情况.结果 波形蛋白和角蛋白阳性表达,证明为HBBDSF.CCK-8法测芹菜素对细胞的IC50值为22.75 μmol·L-1,R2 = 0.797.CCK-8和EDU-488法显示经芹菜素处理后细胞增殖能力明显抑制(P＜0.01);细胞划痕实验显示芹菜素对细胞迁移能力明显抑制(P＜0.01);芹菜素可诱导细胞凋亡的发生(P＜0.01);芹菜素抑制细胞中TGF-β1、α-SMA、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白的表达(P＜0.05).结论 芹菜素可通过抑制TGF-β1表达来抑制HBBDSF的增殖、迁移能力,并诱导凋亡;同时细胞中的TGF-β1、α-SMA、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白的表达水平明显降低.