鸡p53mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

Progress in Veterinary Medicine（2021）

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摘要

p53肿瘤蛋白由p53基因编码,在机体内有多种作用,例如,修复损伤DNA,调控细胞周期以及细胞凋亡,能够抑制肿瘤的发生.根据已发表的鸡p53 mRNA相关基因序列设计引物,提取鸡免疫器官总RNA,通过转录、纯化、链接等步骤,以提取的重组阳性质粒为标准品进行检测,绘制标准曲线,并对其特异性进行检测,建立了鸡p53 mRNA实时荧光定量检测方法.应用该方法对雏鸡免疫器官的p53 mRNA表达量进行检测,发现传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)感染21日龄SPF雏鸡后,其胸腺与脾脏中p53 mRNA表达第3天显著高于相应对照雏鸡;法氏囊中p53 mRNA表达量在病毒感染后5 d～7 d显著或极显著增高.试验结果表明,此检测方法重复性好,可操作性强,可以用于相关基因的检测.

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