离子交换层析分离纯化甘薯β-淀粉酶
Journal of Henan Institute of Science and Technology(Natural Sciences Edition)(2017)
摘要
应用新型离子交换柱层析分离甘薯中β-淀粉酶.采用HiTrap Capto Q强阴离子柱对甘薯β-淀粉酶进行分离纯化,纯化的样品经SDS-PAGE分析纯度.结果表明:pH值为6.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液条件下纯化效果最佳,分离色谱图显示洗脱液在280 nm的紫外吸收值最大,为496.32 mAU,蛋白峰面积最大,为225.55;洗脱液经SDS-PAGE分析为单一条带;经HiTrap Capto Q柱分离纯化后,β-淀粉酶比活力提高至96 885 U/mg,纯化倍数为15.32,酶回收率为18.30%.研究表明HiTrap Capto Q柱层析纯化能够快速高效地纯化甘薯β-淀粉酶,纯化工艺过程简单、快速、高效.研究对工业生产中运用此技术提高β-淀粉酶的分离纯化效率具有理论及实践意义.
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