GATA-3启动子报告基因载体构建及其活性鉴定
wf(2016)
Abstract
目的:转录因子G A TA-3在人乳腺癌的发生发展中扮演重要的角色,研究其转录调控有重要意义。方法从人乳腺癌细胞系M CF-7提取基因组DNA 为模板,以PCR 方法扩增获得GATA-3启动子序列,将片段克隆到pGL3-Basic载体内,鉴定后通过报告基因检测系统检测G A TA-3启动子报告基因的荧光素酶活性。结果双酶切、基因测序鉴定结果显示,成功构建了GATA-3启动子报告基因,并在M CF-7细胞内鉴定了其具有荧光素酶的表达活性。结论本实验成功构建了GATA-3启动子报告基因载体pG L 3-GATA-3pro-L uc,为后续GATA-3在乳腺癌中表达及其调控通路以及以GATA-3为靶标的抗肿瘤药物研究提供了有效工具。
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Key words
breast neoplasm,GATA-3,Promoter,Reporter gene
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