黑龙江省苏云金杆菌的分离及对夜蛾科昆虫高毒力菌株的筛选

【目的】为了发掘新的苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis）的资源，在黑龙江省不同地区采集不同类型的土壤样品分离出对夜蛾科具有高毒力的菌株。【方法】采用醋酸钠选择性筛选法筛选Bt菌株，利用10对通用引物对分离株进行基因型分析，SDS-PAGE进行杀虫晶体蛋白分析，同时测定苏云金杆菌分离株对棉铃虫 Helicoverpa armigera (Hübner)、甘蓝夜蛾 Mamestra brassicae(Linnaeus)、斜纹夜蛾Spodoptera litura (Fabricius)的杀虫活性。【结果】从黑龙江省不同地区采集的352份不同类型的土壤样品中，共分离出46株苏云金芽孢杆菌野生菌株，出菌率为13.06%。油镜下可观察到伴孢晶体的形态有菱形、球形、镶嵌形及不规则形。结果表明产菱形晶体的菌株多含有 cry1类基因，而同时产生菱形、球形及不规则形晶体的菌株则含有多种基因型。SDS-PAGE蛋白分析发现这些菌株主要表达130、90、60 ku蛋白。对其中的部分菌株进行毒力测定，结果表明有4株菌株对3种夜蛾科昆虫具有高毒力。【结论】黑龙江省苏云金芽孢杆菌分布广泛，类型多样，已获得对夜蛾科昆虫有高毒力的菌株，这对夜蛾科害虫的绿色防控及延缓其抗性具有重要意义。