注射用重组人干扰素β1b规模化分离纯化工艺的建立及其产品质量的检定

目的 建立注射用重组人干扰素β1b(recombinant human interferonβ1b,rhIFNβ1b)规模化纯化工艺,并对该工艺制备产品的质量进行检定.方法 采用高压均质机对rhIFNβ1b/BL21菌体进行破碎,离心提取包涵体,经有机抽提及酸化沉淀获得粗制rhIFNβ1b;通过Sephacryl S-200和Sephadex G-25层析纯化获得rhIFNβ1b原液,连续生产3批.将原液稀释,加入保护剂,经分装、冻干制备成品.同时对原液及成品的质量进行检定.结果 3批rhIFNβ1b原液蛋白产量可达6～7g,平均回收率可达15.1％,平均效价为1.1×107IU/mg,HPLC纯度和SDS-PAGE纯度均超过97％,一级序列和二级结构具有良好的一致性.每批rhIFNβ1b原液可制备出20 000～30 000支成品,且各项检定项目均合格.结论 建立了rhIFNβ1b规模化分离纯化工艺,制品的产量、纯度及活性均较高,符合rhIFNβ1b工业化生产的要求.