表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型构建与鉴定
wf(2017)
Abstract
目的:建立能够表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型,为评价 TBEV感染时RdRp酶的活性提供研究平台。方法将线性化的pRP .ExBi‐EF1α‐NS5‐IRES‐eGFP质粒显微注射入FVB/N小鼠受精卵雄原核,移入假孕母鼠输卵管内,构建并筛选转基因首建鼠;首建鼠传代并筛选出遗传性状稳定的纯合子转基因小鼠;检测TBEV NS5基因的表达。结果成功筛选出5只转基因首建鼠并传代至F5代,PCR、RT‐PCR及Western blot检测结果表明,转基因小鼠成功表达了TBEV NS5基因。结论成功构建了表达森林脑炎病毒NS5蛋白的转基因小鼠模型。
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Key words
Tick-borne encephalitis virus,NS5 protein,RNA-dependent RNA polymerase
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