替加环素体外诱导金黄色葡萄球菌耐药株16SrRNA基因突变位点分析

目的 体外诱导替加环素耐药金黄色葡萄球菌的核糖体16SrRNA基因位点变异研究.方法 收集4株替加环素均敏感的金黄色葡萄球菌,分别编号为S2、S3、MS2和N315,通过体外不同浓度梯度多步诱导替加环素耐药;挑取单克隆,经BD公司viet自动药敏分析仪分析常规药敏特点;用E-test条测定母株和诱导菌株替加环素MIC值,并用琼脂平板稀释法测定诱导系列Omacycline和Eravacycline的MIC值;提取耐药菌株基因组DNA,PCR扩增金黄色葡萄球菌5个拷贝的16SrRNA基因,扩增产物经测序后与野生株比较获得突变位点.结果 经体外多步法诱导替加环素耐药的不同MIC值的金黄色葡萄球菌共8株.PCR测序分析4株母株均无变异位点,16SrRNA的突变位点主要是C1036T、G848C,此外还有T1043C、T1125C、T1038G、A1053G、T1283C、C 1042T、C1047T、G1035A、C817G、G1107C、G697T、C819G.结论 体外多步法可诱导金黄色葡萄球菌替加环素耐药,耐药机制可能与16SrRNA位点发生C1036T和G848C突变相关,但仍需进一步研究证实突变位点与耐药的关系.