丙型肝炎病毒非结构蛋白NS2核酸适配子的功能鉴定

目的 对丙型肝炎病毒非结构蛋白NS2核酸适配子功能进行鉴定.方法 应用ELISA方法检测适配子与HCV-NS2蛋白的亲和力,检测适配子与HCV阳性血清的结合能力和适配子与不同比例稀释的HCV阳性血清的结合能力,并与HCV阴性血清比较.结果 筛选得到4条适配子序列A1、A2、A3、A4.4条适配子与HCV-NS2蛋白的亲和力检测吸光度值分别为:A1:0.263、A2:0.515、A3:0.427、A4:0.339,均高于阴性对照吸光度值0.001,差异有统计学意义(P≤0.001);4条适配子均与HCV-NS2蛋白有较高的亲和力,其中,适配子A2与HCV-NS2蛋白的亲和力最高.适配子A2与10人份不同人来源的HCV阳性献血者血清(P1-P10)的结合吸光度分别为0.157、0.145、0.165、0.140、0.241、0.129、0.137、0.222、0.138、0.136,高于其与阴性血清结合吸光度0.006,差异有统计学意义(P≤0.001).HCV-NS2与1∶0、1∶1、1∶2稀释的HCV阳性血清结合吸光度分别为0.223、0.151、0.093,均高于其与阴性血清结合吸光度0.005,差异有统计学意义(P≤0.001);HCV-NS2适配子与不同比例稀释的HCV阳性血清的结合呈剂量依赖性.结论 筛选得到的HCV-NS2适配子功能鉴定表明其具有较强的应用价值.