miR⁃22⁃3p对IL⁃1β诱导软骨细胞损伤的影响及其机制研究
Journal of Molecular Diagnosis and Therapy(2020)
Abstract
目的 探讨miR?22?3p对IL?1β诱导软骨细胞损伤的影响及其作用机制.方法 分离培养大鼠软骨细胞,IL?1β处理细胞48 h构建细胞损伤模型.qRT?PCR与Western blot检测Con组、IL?1β组、IL?1β+miR?NC组、IL?1β+miR?22?3p组、IL?1β+si?NC组、IL?1β+si?TRIM8组、IL?1β+miR?22?3p+pcDNA组、IL?1β+miR?22?3p+pcDNA?TRIM8组细胞中miR?22?3p、TRIM8的表达水平;ELISA检测各组细胞IL?6、IFN?γ、TNF?α的水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证miR?22?3p与TRIM8的靶向调控作用;Western blot检测各组Bcl?2、Bax的表达量.结果 与对照组比较,IL?1β组细胞中miR?22?3p的表达水平、Bcl?2蛋白水平显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),TRIM8、Bax的表达水平与IL?6、IFN?γ、TNF?α的水平显著升高(P<0.05);转染miR?22?3p mimics或转染si?TRIM8可明显降低IL?6、IFN?γ、TNF?α的水平与细胞凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05),增加Bcl?2蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR?22?3p可靶向结合TRIM8;共转染miR?22?3p mimics与pcDNA?TRIM8可明显降低转染miR?22?3p mimics对细胞凋亡及炎症反应的抑制作用.结论 miR?22?3p可靶向抑制TRIM8表达从而减轻IL?1β诱导的软骨细胞炎症损伤及抑制细胞凋亡.
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