腺苷酸基琥珀酸活化AMPK抑制肝细胞内脂质蓄积的作用机制

目的 揭示腺苷酸基琥珀酸(盐)(S-AMP)的生物学新功能.方法 以AMP活化蛋白激酶(AMPK)的天然底物AMP为参照,应用表面等离子共振研究S-AMP和AMPK的相互作用特征.分别构建脂质蓄积和糖蓄积的HepG2细胞模型,通过特定浓度的S-AMP和对照药物作用后测定HepG2细胞内甘油三酯浓度和葡萄糖浓度,研究S-AMP和AMP降脂和降糖的作用规律.用Western blot研究S-AMP作用HepG2细胞后提高AMPK磷酸化水平及其下游糖、脂质代谢通路中关键蛋白质的表达量变化规律,提出S-AMP的作用机制.最后利用饮食诱导的糖尿病和高血脂症金黄地鼠模型研究S-AMP促进糖脂代谢的药效.结果 S-AMP和AMPKγ亚基形成复合体后提高AMPK磷酸化水平,提高AMPK下游的甘油三酯脂肪酶和乙酰辅酶A羧化酶的表达量和磷酸化.促进葡萄糖分解的PFKFB3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3 enzyme)蛋白和转化为糖原的蛋白质糖原合成酶的表达量没有明显变化,S-AMP显示出的降脂活性高于同等浓度的洛伐他汀.结论 发现了S-AMP降低脂质蓄积的作用机制.