诱导骨髓间充质干细胞向脂肪细胞的分化

背景:骨髓间充质干细胞可向成骨细胞、脂肪细胞等多个方向分化,建立稳定可靠的诱导骨髓间充质干细胞成脂分化的方法可为该细胞用于骨质疏松症等骨骼系统相关疾病的防治研究提供保证. 目的:探讨骨髓间充质干细胞在体外定向分化为脂肪细胞的适宜诱导条件. 方法:无菌条件下分离大鼠股骨,密度梯度离心法与贴壁培养法相结合分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养.第3代骨髓间充质干细胞完全汇合后,利用含有3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、吲哚美辛、地塞米松、胰岛素及胎牛血清的 DMEM 低糖培养液定向诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞. 结果与结论:①倒置显微镜下观察,传3代后可获得均一性较高的骨髓间充质干细胞,经过诱导可定向分化成脂肪细胞.②在3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、吲哚美辛、地塞米松诱导的条件下,采取间断诱导方法,骨髓间充质干细胞在体外可定向分化为脂肪细胞.③实验中用5×10-4 mol/L IBMX,2×10-4 mol/L 吲哚美辛,10-4 mol/L 地塞米松诱导间充质干细胞的成脂分化效果较好.提示骨髓间充质干细胞经含0.1 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、10 mg/L 胰岛素、0.1 mmol/L 吲哚美辛、1μmol/L 地塞米松、体积分数为10%胎牛血清的 DMEM 分化诱导液定向诱导可获得较好的成脂分化效果.