叉头框转录因子O亚族1对高糖环境下胰岛β细胞生长及细胞周期分布影响
Journal of Clinical and Experimental Medicine(2018)
Abstract
目的 研究叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)对高糖诱导的胰岛β细胞生长和周期分布的影响.方法 INS-1细胞分成对照组、高糖组、阴性+高糖组、干扰+高糖组共4组,处理方法如下:对照组:INS-1细胞不做任何处理.高糖组:用含有25 mmol/L的葡萄糖的细胞培养液培养1d.阴性+高糖组:用含有25 mmol/L的葡萄糖的细胞培养液培养1d,细胞为稳定感染shRNA control慢病毒的INS-1细胞.干扰+高糖组:用舍有25 mmol/L的葡萄糖的细胞培养液培养1d,细胞为稳定感染FOXO1 shRNA慢病毒的INS-1细胞.用Western blot和qRT-PCR检测细胞中FOXO1的表达情况,CCK-8测定细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Western blot方法测定细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p27蛋白水平.结果 高糖组胰岛β细胞中FOXO1表达水平高于对照组,干扰+高糖组胰岛β细胞中FOXO1的表达水平低于高糖组,阴性+高糖组细胞中FOXO1的表达水平与高糖组比较没有变化.高糖组胰岛β细胞增殖能力降低,细胞G0/G1期比率升高,细胞中cyclinD1蛋白水平降低,p27蛋白水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).干扰+高糖组胰岛β细胞增殖能力升高,细胞G0/G1期比率降低,细胞中cyclinD1蛋白水平升高,p27蛋白水平降低,与高糖组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 高糖诱导胰岛β细胞中FOXO1表达,敲低其表达能够逆转高糖对胰岛β细胞的增殖抑制和细胞周期阻滞作用.
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