瑞巴派特对阿司匹林所致人结肠癌细胞株Caco-2损伤的保护作用及其机制探讨

随着胶囊内镜的问世，非甾体消炎药（ NSAIDs）引起的小肠损伤日益受到重视。虽然有多种用于防治NSAIDs 相关胃黏膜损伤的药物，但对于NSAIDs 相关小肠黏膜损伤，至今仍缺乏有效的防治措施。目的：探讨瑞巴派特对阿司匹林所致人结肠癌细胞株Caco-2损伤的保护作用及其可能机制。方法：以经阿司匹林10 mmol/ L 处理的Caco-2细胞作为阿司匹林组，经阿司匹林联合不同浓度（0.1、0.5、1.0 mmol/ L）瑞巴派特处理的Caco-2细胞作为瑞巴派特组，同时设立阴性对照组。采用MTT 实验检测细胞增殖抑制情况；采用流式细胞术检测细胞凋亡情况；采用倒置相差显微镜观察细胞形态学变化；采用Transwell 实验检测细胞通透性；采用蛋白质印迹法检测紧密连接蛋白occludin、闭锁小带蛋白-1（ZO-1）以及丝裂原活化蛋白激酶（ MAPK）信号通路相关蛋白细胞外信号调节激酶（ERK）1/2、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）、p38、p-p38、c-Jun 氨基端激酶（JNK）、p-JNK 表达。结果：瑞巴派特0.1、0.5、1.0 mmol/ L组Caco-2细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、细胞通透性均显著低于阿司匹林组（ P <0.05），且随瑞巴派特浓度升高而逐渐降低（P <0.05）。倒置相差显微镜观察显示，阿司匹林可诱导Caco-2细胞损伤，而瑞巴派特可减轻阿司匹林引起的细胞损伤。与阿司匹林组相比，瑞巴派特0.1、0.5、1.0 mmol/ L 组occludin、ZO-1、p-JNK 表达显著升高（P <0.05），p-p38、p-ERK1/2表达显著降低（P <0.05），变化均呈瑞巴派特浓度依赖性（ P <0.05）。结论：瑞巴派特可能通过调节MAPK 信号通路（抑制p38、ERK1/2磷酸化，促进JNK 磷酸化），使紧密连接蛋白表达上调、细胞通透性降低，从而防治阿司匹林所致Caco-2细胞损伤。