线粒体分裂抑制剂通过抑制自噬加重OGD／R 损伤

目的：探讨线粒体分裂抑制剂（ Mdivi-1）处理对原代培养的皮层神经元缺血再灌注损伤的作用及其机制研究。方法在原代培养的小鼠皮层神经元上建立氧糖剥夺／复氧复糖（ OGD／R）模型模拟体内缺血再灌注损伤，根据再灌注时间长短检测自噬的发生情况，并进一步选取自噬发生最明显的时间点。然后分别采用自噬抑制剂-3-MA、自噬激动剂-雷帕霉素（ rapamycin ）、Mdivi-1以及联合rapamycin和Mdivi-1进行干预，分别从mRNA以及蛋白水平检测自噬相关分子的改变，并同时检测神经元损伤情况。结果 OGD／R处理后，神经元自噬随再灌注时间增长而上调，在OGD 2 h／R 24 h时，Beclin 1以及微管相关轻链蛋白3 II／I（LC3 II／I）比值均达峰值（P＜0．001，P＜0．01）。细胞活力结果显示，rapamycin可减轻OGD／R损伤（P＜0．01），Mdivi-1则会加重OGD／R损伤（P＜0．05），但rapamycin可通过增加自噬来减轻Mdivi-1造成的损伤（ P＜0．05）。蛋白检测结果显示，OGD／R处理后，Mdivi-1可明显降低神经元细胞内Beclin 1和LC3 II的表达（P＜0．05）。结论 Mdivi-1可能通过抑制自噬的发生，从而加重神经元OGD／R损伤。