肾移植急性排斥大鼠的CD4+CD25+调节性T细胞水平及相关调节因子的表达变化
Chinese Journal of Nephrology(2019)
摘要
目的 观察肾移植术后急性排斥大鼠外周血中叉头状转录因子3(Foxp3)阳性的CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)水平及其T盒转录因子TBX1(TBX1)和肌细胞特异性增强因子2D(MEF2D)表达变化,结合肾功能、血浆白细胞介素10(IL-10)、干扰素γ(IFN-γ)及肾组织病理变化,探讨其中的调控机制.方法 建立大鼠肾移植模型,分为急性排斥组(急排组)和非急性排斥(非急排)组.测定两组大鼠肾功能(尿素氮和血肌酐);ELISA 法测定血浆中IL-10和IFN-γ;HE染色法观察肾脏组织病理.应用流式细胞术分选测定CD4+CD25+Treg细胞;实时定量PCR测定CD4+CD25+Treg细胞的Foxp3、TBX1和MEF2DmRNA表达;Western印迹测定CD4+CD25+Treg细胞Foxp3、TBX1和MEF2D蛋白表达.结果 与非急排组相比,急排组尿素氮和血肌酐均升高,IL-10下降,IFN-γ升高(均P<0.05).急排组肾组织病理出现肾小球肥大和系膜细胞显著增生,毛细血管增生和中性粒细胞浸润;肾间质明显水肿和肾小管坏死,伴有淋巴细胞、浆细胞及中性粒细胞浸润.与非急排组相比,急排组外周血CD4+CD25+Treg细胞比例降低(4.50%±0.50%比5.74%± 1.96%,P<0.05),CD4+CD25+Treg细胞Foxp3、MEF2D的mRNA和蛋白表达均降低(均P<0.01),TBX1的mRNA和蛋白表达均升高(均P<0.01).结论 肾移植急性排斥大鼠免疫耐受细胞CD4+CD25+Treg细胞减少,Foxp3、MEF2D、IL-10表达降低,TBX1、IFN-γ表达增强,共同促进肾移植急性排斥反应的发生发展,加重肾损伤.
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关键词
Graft rejection,T-lymphocytes,Forkhead transcription factors,T-box domain proteins,MEF2 transcription factors
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