新生大鼠原代小胶质细胞分离培养方法的改良

目的 研究改良体外小胶质细胞分离培养的方法及效果.传统法存在动物用量大、成本高且细胞培养时间长等局限.方法 结合消化试剂组合和手摇震荡法培养分离小胶质细胞;同时采用Iba-1免疫荧光法进行细胞鉴定和纯度分析, 台盼蓝染料法进行活力检测以及脂多糖刺激比较不同状态的小胶质细胞.结果 改良法可在4 d内稳定获得小胶质细胞＞ 1. 0×106个/60 mm培养皿, 纯度≥98％, 活力＞ 98％, 较传统法在动物用量、总成本和培养时间分别减少了2、3. 2、1. 5倍.结论 改良法可减少动物用量、降低成本, 缩短细胞培养时间;为研究小胶质细胞的生物学功能和中枢神经系统疾病机制建立了一种稳定、简便、高效的细胞模型.