不同冻存时间对 CIK 细胞免疫表型及杀伤活性的影响
wf(2016)
Abstract
目的:探讨不同冻存时间对外周血来源的 CIK 细胞免疫表型及其杀伤活性的影响。方法:采集6名健康患者外周血,分离外周血单个核细胞培养,第0h 加入 IFN -γ,24h 后加入 IL -2、抗 CD3单抗,每隔3天补充含 CD3单抗、IL -2的新鲜培养液,培养15天进行冻存。复苏冻存1、2、3、4、5月的 CIK 细胞为实验组,以常规培养至15天的 CIK 细胞为对照组。利用流式细胞仪检测各组 CIK 细胞中 CD3+ CD4+、CD3+ CD8+、CD3+ CD56+细胞的百分比,CCK8法检测各组 CIK 细胞对 K562细胞的杀伤活性。结果:冻存1、2、3月的 CIK细胞与对照相比 CD3+ CD4+、CD3+ CD8+、CD3+ CD56+细胞比例无明显差异(P >0.05),冻存4、5月的 CIK细胞中 CD3+ CD8+、CD3+ CD56+细胞比例较对照组明显下降[(70.62±6.35)%、(14.36±4.28)%、(67.87±5.63)%、(12.61±6.21)% vs(84.23±5.20)%、(22.75±3.46)%],P <0.05。对靶细胞的杀伤能力在1、2、3月时与对照相比未见明显减弱(P >0.05),冻存4月、5月后的 CIK 细胞在各效靶比对 K562细胞的杀伤活性与对照相比明显减弱(P <0.05)。结论:冻存时间的长短对 CIK 细胞的免疫表型及杀伤活性均有一定的影响,且随着冻存时间的延长,CIK 细胞的杀伤活性减弱。建议冻存 CIK 细胞的最佳时间为1、2和3月。
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Key words
cytokine induced killer cells,cryopreservation,immunophenotype,killing activities
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