慢病毒载体介导RNAi稳定抑制VASH1表达对人脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨运用慢病毒载体介导的RNA干扰技术抑制血管生成抑制因子1(VASH1)的表达对人脑胶质瘤U-87MG细胞增殖和凋亡的影响.方法 应用pGCL-GFP质粒构建针对VASH1的慢病毒shRNA载体,转染入工具细胞293T,筛选出适合浓度的慢病毒转染人脑胶质瘤U-87MG细胞;通过RT-PCR和Western blot评价其对U-87MG细胞内VASH1表达的影响;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察U-87MG细胞增殖活性的改变;用流式细胞仪(FCM)检测U-87MG细胞凋亡的变化.结果 与转染阴性对照组和空白组相比,转染pGCL-GFP-VASH1慢病毒载体的U-87MG细胞VASH1的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P＜0.01);细胞的增殖活性显著上调(P＜0.01),细胞凋亡明显减少(P＜0.01).结论 VASH1shRNA慢病毒载体可抑制VASH1在人脑胶质瘤U-87MG细胞中的表达,并增加肿瘤细胞的增殖活性,抑制细胞凋亡.