缺氧诱导因子-1α参与缺氧条件下小胶质细胞的自噬和凋亡

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)在缺氧诱导小胶质细胞自噬和凋亡中的作用.方法:体外培养大鼠小胶质细胞,缺氧处理后利用Iba1免疫组织化学法标记小胶质细胞;用RT-PCR检测缺氧后HIF-1α mRNA的表达;Western Blot检测HIF-1α和自噬标记物LC3的蛋白表达;TUNEL染色法检测细胞凋亡.针对大鼠HIF-1α基因序列构建特异的siRNA并转染小胶质细胞,检测缺氧后LC3表达与细胞凋亡的改变.结果:与对照组相比,缺氧后Iba1表达明显增强、HIF-1 α和自噬标记物LC3-Ⅱ表达上升(P＜0.05)、衡量细胞自噬水平的LC-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增高(P＜0.05),TUNEL+细胞百分数(35.6±5.9％)较对照组(6.8±1.2％)比较显著增加(P＜0.05);沉默HIF-1α表达后,LC3-Ⅱ蛋白和LC-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低(P＜0.05)、TUNEL+细胞百分数(23.0±0.8％)较对照组(40.1±4.5％)比较亦显著减少(P＜0.05).结论:HIF-1α参与缺氧条件下小胶质细胞的自噬和凋亡.