靶向SOX4基因的慢病毒感染对骨肉瘤MG63细胞凋亡的影响

目的:探讨靶向SOX4基因的慢病毒感染对骨肉瘤细胞凋亡的影响.方法:体外培养人成骨细胞株hFOB1.19和骨肉瘤细胞株MG63,采用qRT-PCR和Western blot检测两种细胞中SOX4 mRNA和蛋白的表达.将MG63细胞分为对照组、阴性组(感染LV-NC-GFP-shRNA)、干扰组(感染LV-SOX4-GFP-shRNA)和干扰+抑制剂组(LV-SOX4-GFP-shRNA感染前加Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO),采用qRT-PCR和Western blot检测对照组、阴性组和干扰组MG63细胞SOX4 mRNA和蛋白的表达情况,用于判断慢病毒感染效果;采用流式细胞仪检测4组细胞凋亡,Western blot检测酶切Caspase-3蛋白的表达,Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性,采用JC-1染色检测线粒体膜电位.结果:与hFOB1.19细胞相比,MG63细胞中SOX4 mRNA和蛋白的表达水平升高(P<0.05);与对照组相比,干扰组MG63细胞中SOX4 mRNA和蛋白的表达降低.干扰组较对照组细胞凋亡增加、Caspase-3活性和酶切蛋白的表达增强,线粒体膜电位降低(P均<0.05),而干扰+抑制剂组上述变化减弱(P<0.05).结论:SOX4促进MG63细胞凋亡的作用机制可能与Caspase-3介导的凋亡途径有关.