沉默PLD2基因对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响
Journal of Chongqing Medical University(2016)
摘要
目的:探讨沉默磷脂酶D2(phospholipases D2,PLD2)基因的表达对人结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响及其潜在的分子机制.方法:采用载有靶向PLD2的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)腺病毒转染SW480和SW620细胞;qRT-PCR和Western blot法检测转染后结肠癌细胞PLD2的mRNA和蛋白质表达的变化;平板克隆形成实验和Transwell小室分别检测各组细胞的增殖和细胞迁移能力的变化;采用Western blot法检测转染前后细胞中周期蛋白D1(Cyclin D1)和基质金属蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)蛋白的表达.结果:转染PLD2 siRNA后结肠癌细胞PLD2 mRNA和蛋白的表达量明显下降(均P<0.01),沉默PLD2表达后细胞的增殖和迁移能力明显受抑制,同时Cyclin D1和MMP-2蛋白的表达量也明显下调(均P=0.000).结论:干扰PLD2表达引起的细胞增殖和迁移能力的下降可能与Cyclin D1和MMP-2表达下调密切相关,提示PLD2可能成为结肠癌治疗的新靶点之一.
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