GDF-5基因重组腺病毒修复人退变髓核细胞的实验研究

目的 探讨腺病毒介导的GDF-5基因对人退变髓核细胞外基质表达的影响,探求一种基因治疗新途径.方法 利用腺病毒载体将GDF-5基因导入退变髓核细胞,设置为空白对照组(Control组)、阴性对照组(GFP组)、实验组(GDF-5组)3组,并分为3、7、14、21天四个观察时间点,分别检测3组髓核细胞sGAG、Hyp的含量,免疫染色、Safranine-O染色观察细胞外基质合成情况,Real-time PCR检测Aggrecan、Collagen Ⅱ mRNA表达水平.结果 GDF-5组髓核细胞sGAG/DNA、Hyp/DNA均在14、21天较Control组和GFP组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05),而Control组与GFP组之间任意观察时间点比较差异均无统计学意义(P＞0.05);免疫染色、Safranine-O染色结果显示GDF-5组髓核细胞的蛋白多糖、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖在14、21天均呈强阳性染色,Control组和GFP组呈弱阳性染色.Real-time PCR结果显示GDF-5组Aggrecan、Collagen Ⅱ mRNA的表达在14、21天较Control组和GFP组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 腺病毒介导的GDF5能明显促进人退变髓核细胞Aggrecan、Collagen Ⅱ mRNA的表达,并增加蛋白多糖、Ⅱ型胶原的合成,对细胞外基质具有明确的修复作用,是一种有效的基因治疗新方法.