LCL161联合多西他赛对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖、凋亡的影响及机制
Shandong Medical Journal(2019)
摘要
目的 观察LCL161联合多西他赛对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 CCK-8法测算1~5μmol/L浓度的LCL161作用于MCF-7细胞24 h后的细胞存活率,选取对细胞增殖无明显抑制作用、细胞毒性较小的2 μmol/L浓度的LCL161用于后续实验.将MCF-7细胞分为4组,LCL161组加入2μmol/L的LCL161,多西他赛组加入0.6 mg/L的多西他赛,LCL161联用多西他赛组加入0.6 mg/L的多西他赛和2μmol/L的LCL161,对照组加入不含药物的培养液.采用CCK-8法测算各组细胞存活率,采用细胞集落克隆实验检测各组细胞集落克隆能力;采用Hoechst33258染色法观察各组细胞晚期凋亡情况,采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞凋亡抑制蛋白cIAP1、cIAP2及程序性坏死蛋白RIP1.结果 LCL161组、多西他赛组、LCL161联用多西他赛组、对照组的细胞存活率分别为86.84%±3.83%、81.29%±6.71%、46.91% ±4.76%和92.77%±2.18%,集落数目分别为(117±14)、(95±9)、(61±12)、(132 ±7)个,LCL161组与对照组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.LCL161组细胞膜通透性增加,染色质固缩,部分细胞发生了核碎裂;多西他赛组和对照组的细胞核均匀淡染,细胞核形态呈椭圆形,细胞膜相对完整;LCL161联用多西他赛组细胞数量明显减少,细胞核碎裂,部分发生了核解体.LCL161组、多西他赛组、LCL161联用多西他赛组、对照组细胞凋亡率分别为15.16%±2.26%、21.42%±1.17%、34.38%±3.27%、5.18%±0.89%,LCL161组与对照组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.LCL161组、多西他赛组、LCL161联用多西他赛组、对照组cIAP1蛋白的相对表达量分别为0.41±0.09、0.29±0.11、0.11±0.04、0.62±0.17,cIAP2蛋白的相对表达量分别为0.86±0.11、0.77±0.15、0.51±0.12、0.98±0.01,LCL161组与对照组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.LCL161组、多西他赛组、LCL161联用多西他赛组、对照组RIP1蛋白的相对表达量分别为1.97 ±0.22、1.84±0.19、3.17±0.26、1.00 ±0.07,LCL161组与多西他赛组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.结论 LCL161联合多西他赛可抑制乳腺癌细胞的增殖,促进其凋亡;LCL161联合多西他赛可通过下调凋亡抑制蛋白、上调程序性坏死蛋白的表达,诱导乳腺癌细胞的凋亡及程序性坏死来发挥抗肿瘤作用.
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