乙型肝炎病毒X蛋白A1762T/G1764A双突变对肝癌细胞生物钟基因表达的影响

目的 研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)A1762T/G1764A双突变对肝癌细胞生物钟基因表达的影响.方法 将Bel-7404细胞接种于6孔板中,待细胞生长至60%融合时按照Lipofectamine2000的说明书分别将1.0μg的pcDNA3.1-HBx和pcDNA3.1-mHBx(A1762T/G1764A双突变)质粒转染肝癌细胞系Bel-7404细胞.采用Real-time PCR和Western blotting法检测Bel-7404细胞中CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、CKIεmRNA及蛋白表达.结果 与转染pcDNA3.1-HBx相比,转染A1762T/G1764A双突变的pcDNA3.1-mHBx表达载体后Bel-7404细胞中Clock、Bmal1、Per2、Per3、Cry1、Cry2 mRNA和蛋白表达均降低(P均<0.05).结论 HBx A1762T/G 1764 A双突变可引起肝癌细胞生物钟基因表达紊乱.